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信号通路
英文名称: Rat Hepcidin (Hepc) ELISA Kit
别名: Hepcidin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.22ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Hepcidin是一种蛋白质，是由HAMP基因编码的，是哺乳动物中铁进入血液循环的一个关键调节器。它是一个紧密折叠的多肽，具有32%的β片特征，并有一个由4个二硫键稳定的发夹结构。Hepcidin以前激素（84个氨基酸）、前激素（60个氨基酸）和激素（25个氨基酸）存在，在尿液中还存在20个和22个氨基酸的血色素代谢物，删除5个N端氨基酸会导致功能丧失。原血色素向血色素的转化是由原激素转化酶furin介导的，这种转化可能受α-1抗胰蛋白酶的调节。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠铁调素(Hepcidin)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠铁调素(Hepcidin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Hepcidin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.14
1.21
0.81
0.53
0.39
0.3
0.25
0.09
校正OD 值
2.05
1.12
0.72
0.44
0.21
0.21
0.16
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Hepcidin , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.6
96.10
血浆(n=8)
92.3-105.5
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.7
105.80
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Hepcidin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.8
91.80
87.0-96.7
93.70
90.9-110.8
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.2
94.20
87.1-108.8
98.30
105.8-115.8
108.80
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