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信号通路
英文名称: Rat N-Acylsphingosine Amidohydrolase 2 (ASAH2) ELISA Kit
别名: ASAH2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.16ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
酰基鞘氨醇脱酰酶2（ASAH2）是一个蛋白质编码基因。与ASAH2相关的疾病包括鞘磷脂病和脂肪瘤病。其相关的途径有：鞘氨醇和鞘氨醇-1-磷酸的代谢和S-1P刺激的信号传导。该基因的一个重要类似物是ASAH2B。Asah2编码的酰基鞘氨醇脱酰酶2在小肠沿刷状边缘高度表达，这表明它可能参与了消化饮食鞘脂的途径。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠酰基鞘氨醇脱酰酶2(ASAH2)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠酰基鞘氨醇脱酰酶2(ASAH2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ASAH2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.56
1.77
1.22
0.71
0.46
0.31
0.23
0.07
校正OD 值
2.47
1.68
1.13
0.62
0.22
0.22
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ASAH2 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.0-102.0
97.70
血浆(n=8)
92.1-105.2
102.10
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.5
105.70
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠ASAH2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.0
91.10
88.3-95.8
92.40
90.9-110.7
96.20
1:04
范围
平均回收率
88.8-103.0
94.20
87.9-108.6
98.70
105.6-115.2
108.20
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