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信号通路
英文名称: Rat Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma (PPAR-γ) ELISA Kit
别名: PPAR-γ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)也被称为格列本脲反向胰岛素抵抗受体,或NR1C3(核受体亚家族1,C组,成员3)是一种II型核受体(蛋白质调节基因),由PPARγ基因编码。它主要存在于脂肪组织、结肠和巨噬细胞中。该基因编码的是过氧化物酶体增殖剂激活受体(PPAR)亚家族核受体的成员。PPARs与视黄醇X受体(RXRs)形成异源二聚体,这些异源二聚体调节各种基因的转录。目前已知有三种PPARs亚型。PPAR-alpha、PPAR-delta和PPAR-gamma。该基因编码的蛋白是PPAR-gamma,是脂肪细胞分化的调节剂。已经描述了编码不同异构体的替代剪接的转录变体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PPAR-γ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.18
1.26
0.77
0.45
0.33
0.24
0.19
0.08
校正OD 值
2.09
1.17
0.68
0.36
0.15
0.15
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PPAR-γ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.4
96.40
血浆(n=8)
92.9-106.0
103.10
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.9
105.80
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠PPAR-γ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-96.3
91.30
88.8-96.8
93.10
90.1-110.5
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.4
94.40
86.3-108.1
98.80
105.8-114.3
107.70
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