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信号通路
英文名称: Rat Complement Component 5a (C5a) ELISA Kit
别名: C5a
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000ng/mL
灵敏度: 6.15ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
C5a是蛋白酶C5-转化酶将补体成分C5裂解为C5a和C5b片段后释放的蛋白质片段，是C5的另一种裂解产物，作为一种高度炎症性的肽,鼓励补体激活，形成MAC,吸引先天性免疫细胞，并在过敏反应中释放组胺。多肽C5a包含74个氨基酸，有11kDa。该分子由四个螺旋组成，由肽环连接，螺旋IV和II、III之间有三个二硫键。在N端有一个短的1.5圈螺旋，但所有的激动剂活性都发生在C端。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠补体片断5a(C5a)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠补体片断5a(C5a)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的C5a, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.3
1.87
1.25
0.82
0.55
0.41
0.32
0.09
校正OD 值
2.21
1.78
1.16
0.73
0.32
0.32
0.23
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠C5a , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.5-101.0
96.20
血浆(n=8)
92.4-105.9
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.8
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠C5a , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.3
91.10
88.2-96.8
93.10
90.1-110.7
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.0
94.70
87.0-108.9
98.10
105.5-115.8
108.40
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