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信号通路
英文名称: Rat Vascular Endothelial Growth Factor A (VEGF-A) ELISA Kit
别名: VEGF-A
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 12.5-800pg/mL
灵敏度: 5.42pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
血管内皮生长因子A(VEGF-A)是一种蛋白质,由VEGFA基因编码的。该基因是血小板衍生生长因子(PDGF)/血管内皮生长因子(VEGF)家族的成员,编码的蛋白质通常以二硫连接的同源二聚体形式出现。该蛋白是一种糖基化的有丝分裂素,特异性地作用于内皮细胞,具有多种作用,包括介导血管通透性增加,诱导血管生成、血管生成和内皮细胞生长,促进细胞迁移,抑制细胞凋亡。编码自由分泌的或与细胞相关的异构体的替代性剪接转录变体已被确定为特征。VEGF-A对血管内皮细胞显示出突出的活性,主要是通过它与内皮细胞膜上突出的VEGFR1和-R2受体的相互作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠血管内皮生长因子A(VEGF-A)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠血管内皮生长因子A(VEGF-A)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的VEGF-A, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
800
400
200
100
50
25
12.5
0
OD值
2.56
1.45
0.8
0.48
0.33
0.23
0.2
0.08
校正OD 值
2.47
1.36
0.71
0.39
0.14
0.14
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠VEGF-A , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.2
96.70
血浆(n=8)
92.7-105.5
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.9
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠VEGF-A , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.6
91.60
88.4-96.1
93.80
90.8-110.8
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.6
94.50
87.8-108.6
98.80
105.2-115.8
108.20
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