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信号通路
英文名称: Rat Protease Activated Receptor 2 (PAR2) ELISA Kit
别名: PAR2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白酶激活受体2(PAR2)也被称为凝血因子II(凝血酶)受体样1(F2RL1)或G-蛋白偶联受体11(GPR11),是一种由F2RL1基因编码的蛋白质。功能性PAR2由几种免疫细胞表达,如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞、肥大细胞和T细胞。PAR2是与鸟苷核苷酸结合蛋白偶联的7-跨膜受体大家族中的一员,它也是蛋白酶激活受体家族的一个成员,被几种不同的内源性和外源性蛋白酶激活。它通过蛋白酶裂解其精氨酸和丝氨酸之间的细胞外氨基末端而被激活。新暴露的N端作为拴住的激活配体,它与细胞外环2(ECL2)上的保守区域结合,激活受体。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠蛋白酶激活受体2(PAR2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠蛋白酶激活受体2(PAR2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PAR2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.23
1.42
0.83
0.5
0.31
0.23
0.18
0.08
校正OD 值
2.14
1.33
0.74
0.41
0.14
0.14
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PAR2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.2-102.9
96.70
细胞裂解液(n=8)
92.7-105.9
102.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠PAR2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.3
93.60
88.7-96.2
90.20
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.3
99.50
87.1-108.7
102.40
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