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信号通路
英文名称: Rat Protein kinase A (PKA) ELISA Kit
别名: PKA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.077ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
蛋白激酶A（PKA）是一个酶家族，其活性取决于细胞中环状AMP（cAMP）的水平。PKA也被称为cAMP依赖的蛋白激酶（EC 2.7.11.11）。它在细胞中具有多种功能，包括调节糖原、糖和脂质的代谢。PKA通常也被称为cAMP依赖性蛋白激酶，因为传统上认为，当第二信使环状腺苷单磷酸（或cAMP）的水平在各种信号的作用下上升时，它通过释放催化亚基被激活。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠蛋白激酶A(PKA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠蛋白激酶A(PKA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PKA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.31
1.29
0.72
0.45
0.31
0.22
0.18
0.08
校正OD 值
2.22
1.2
0.63
0.36
0.13
0.13
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PKA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.6-102.3
96.10
细胞裂解液(n=8)
92.7-106.7
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.4
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度大鼠PKA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.9
91.60
88.7-96.6
93.90
90.8-110.2
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.4
95.70
87.3-108.3
98.40
105.2-114.9
107.70
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