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信号通路
英文名称: Rat Glucose Transporter 4 (GLUT4) ELISA Kit
别名: GLUT4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.23ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
葡萄糖转运蛋白4(GLUT4),又称溶质载体家族2,促进葡萄糖转运体成员4,是一种蛋白质,由SLC2A4基因编码。GLUT4是受胰岛素调节的葡萄糖转运体,主要存在于脂肪组织和横纹肌(骨骼肌和心肌)。在细胞表面,GLUT4允许循环中的葡萄糖沿着浓度梯度扩散到肌肉和脂肪细胞。一旦进入细胞,葡萄糖会被肝脏的葡萄糖激酶和其他组织的己糖激酶迅速磷酸化,形成葡萄糖-6-磷酸,然后进入糖酵解或聚合成糖原。像所有的蛋白质一样,GLUT4的主序列中独特的氨基酸排列使它能够跨越质膜运输葡萄糖。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的GLUT4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.15
1.46
0.87
0.6
0.39
0.28
0.21
0.09
校正OD 值
2.06
1.37
0.78
0.51
0.19
0.19
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠GLUT4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.6
105.30
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠细胞培养上清中加入高浓度大鼠GLUT4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
90.1-110.6
96.80
1:04
范围
平均回收率
105.7-115.2
108.50
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