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信号通路
英文名称: Rat Phospholipase A2, Lipoprotein Associated (LpPLA2) ELISA Kit
别名: LpPLA2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 12.5-800pg/mL
灵敏度: 5.15pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)也被称为血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH),是一种磷脂酶A2,由PLA2G7基因编码。Lp-PLA2是一种45kDa的蛋白质,有441个氨基酸。在血液中,Lp-PLA2主要与低密度脂蛋白(LDL)一起流动,不到20%与高密度脂蛋白HDL有关。它是一种由炎症细胞产生的酶,可以水解低密度脂蛋白中的氧化磷脂。Lp-PLA2通过水解sn-2位的乙酰基,催化PAF降解为非活性产品,产生生物活性产品LYSO-PAF和乙酸盐。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠脂蛋白关联磷脂酶A2(LpPLA2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的LpPLA2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
800
400
200
100
50
25
12.5
0
OD值
2.47
1.73
1.33
0.92
0.63
0.44
0.32
0.09
校正OD 值
2.38
1.64
1.24
0.83
0.35
0.35
0.23
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠LpPLA2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.0
96.40
血浆(n=8)
93.6-105.3
102.80
组织匀浆(n=8)
96.3-108.9
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度大鼠LpPLA2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.3
91.70
88.7-96.9
93.70
90.1-110.9
95.70
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.0
94.40
87.3-108.7
98.50
105.7-115.1
108.80
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