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信号通路
英文名称: Rat Caspase 8 (CASP8) ELISA Kit
别名: CASP8
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Caspase-8是一种caspase蛋白，由CASP8基因编码。它最有可能作用于caspase-3。CASP8的同源物已在许多有完整基因组数据的哺乳动物中被发现。CASP8基因编码的是半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶（caspase）家族的一个成员。在细胞凋亡的执行阶段，caspase的顺序激活起着核心作用。caspase作为无活性的原酶存在，由一个原域、一个大蛋白酶亚单位和一个小蛋白酶亚单位组成。激活Caspases需要在保守的内部天冬氨酸残基处进行蛋白加工，以产生由大亚基和小亚基组成的异构体酶。该蛋白参与由Fas和各种凋亡刺激物诱导的程序性细胞死亡。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠胱天蛋白酶8(CASP8)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠胱天蛋白酶8(CASP8)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的CASP8, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.12
1.16
0.7
0.42
0.27
0.21
0.18
0.08
校正OD 值
2.03
1.07
0.61
0.33
0.12
0.12
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠CASP8 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.4-101.7
96.90
细胞裂解液(n=8)
92.7-105.0
102.60
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠CASP8 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.7
93.30
88.3-96.4
90.30
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.7
100.70
87.4-108.3
102.10
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