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信号通路
英文名称: Rat Choline Acetyltransferase (ChAT) ELISA Kit
别名: ChAT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.074ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
胆碱乙酰转移酶(ChAT)是一种转移酶，由CHAT基因编码的，负责合成神经递质乙酰胆碱。它催化乙酰基团从辅酶乙酰-CoA转移到胆碱，产生乙酰胆碱（ACH）。它在中枢神经系统（CNS）和周围神经系统（PNS）的胆碱能神经元中含量很高。与大多数神经末梢蛋白一样，ChAT在神经元体内产生并被运送到神经末梢，在那里它的浓度最高。一个神经细胞中存在ChAT，就把这个细胞归类为 "胆碱能 "神经元。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠胆碱乙酰转移酶(ChAT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ChAT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.65
1.92
1.38
0.95
0.61
0.39
0.23
0.08
校正OD 值
2.56
1.83
1.29
0.86
0.3
0.3
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ChAT , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.3-101.5
96.20
细胞裂解液(n=8)
92.9-105.7
102.70
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠ChAT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.2
93.80
88.0-96.0
92.90
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.8
100.90
88.0-108.7
102.10
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