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信号通路
英文名称: Rat Nephrin (NPHN) ELISA Kit
别名: NPHN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 尿液、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肾足蛋白(NPHN)是肾脏滤过屏障正常运作所必需的一种蛋白质。肾脏过滤屏障由裂隙内皮细胞、肾小球基底膜和上皮细胞的荚膜组成。它是一种跨膜蛋白，是裂隙隔膜的结构成分。它们以错综复杂的网状结构存在于荚膜细胞的顶端，传递强烈的负电荷，排斥蛋白质穿过鲍曼空间。它的基因缺陷，即NPHS1，与芬兰型先天性肾病综合征有关，导致大量蛋白质渗入尿液，即蛋白尿。它也是心血管发育所必需的。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠肾足蛋白(NPHN)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠肾足蛋白(NPHN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的NPHN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.66
1.97
1.36
0.83
0.51
0.32
0.2
0.08
校正OD 值
2.57
1.88
1.27
0.74
0.23
0.23
0.11
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠NPHN , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.4-101.7
96.60
细胞裂解液(n=8)
92.8-105.5
102.20
细胞培养上清(n=8)
96.3-108.4
105.50
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度大鼠NPHN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.0
91.30
88.0-96.1
93.10
90.2-110.1
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.2
94.40
87.9-108.1
98.20
105.8-115.4
108.10
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