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信号通路
英文名称: Rat Heparin Binding Epidermal Growth Factor Like Growth Factor (HB-EGF) ELISA Kit
别名: HB-EGF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 6.24pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)是EGF家族中的一个成员,由HBEGF基因编码。HB-EGF样生长因子是作为一种膜锚定的有丝分裂和趋化糖蛋白合成的。由单核细胞和巨噬细胞产生的一种表皮生长因子,由于与肝素的亲和力,被称为HB-EGF。它已被证明在伤口愈合、心脏肥大以及心脏发育和功能中发挥作用。HB-EGF是一种87个氨基酸的糖蛋白,显示出高度调控的基因表达。它的跨膜形式是白喉毒素的独特受体,在细胞中发挥着并联信号的功能。HB-EGF的两种形式都参与正常的生理过程和病理过程,包括肿瘤进展和转移、器官增生和动脉粥样硬化疾病。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的HB-EGF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.29
1.29
0.71
0.43
0.29
0.2
0.18
0.07
校正OD 值
2.2
1.2
0.62
0.34
0.11
0.11
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠HB-EGF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.0
96.30
血浆(n=8)
92.8-105.4
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.4
105.40
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠HB-EGF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.2
91.80
88.9-96.0
93.60
90.5-110.6
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.5
94.10
87.3-108.3
98.30
105.6-115.6
108.30
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