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信号通路
英文名称: Rat Extracellular Signal Regulated Kinase 1(ERK1)ELISA Kit
别名: ERK1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.625-40ng/mL
灵敏度: 0.319ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
细胞外信号调节激酶 1(ERK1)也被称为 p44MAP,是一种由 MAPK3 基因编 码的酶。该基因所编码的蛋白是有丝分裂原活化蛋白激酶(MAP 激酶)家族 的成员。MAP 激酶,也被称为细胞外信号调节激酶(ERKs),在一个信号 级联中起作用,调节各种细胞过程,如增殖、分化和细胞周期进展,以应对 各种细胞外信号。这种激酶被上游激酶激活,导致其转移到细胞核,在那里 它对核目标进行磷酸化。编码不同蛋白异构体的替代剪接转录变体已被描述。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠细胞外信号调节激酶1(ERK1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ERK1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.01
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ERK1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.2
96.90
血浆(n=8)
92.8-105.7
103.20
组织匀浆(n=8)
96.4-108.5
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆组织匀浆中加入高浓度大鼠ERK1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
组织匀浆
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.6
91.20
88.0-96.8
93.80
90.8-110.8
95.60
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.2
94.10
87.4-108.9
98.50
105.5-115.9
108.10
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