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信号通路
英文名称: Rat Plasminogen Activator, Tissue (t-PA) ELISA Kit
别名: t-PA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)又称PLAT,是一种参与血凝块分解的蛋白质。它是一种丝氨酸蛋白酶,存在于内皮细胞,即血管内的细胞。作为一种酶,它能催化浆蛋白原转化为浆蛋白,这是负责血块分解的主要酶。tPA可以用重组生物技术制造;用这种方法生产的tPA被称为重组组织浆细胞生成素激活剂(rtPA)。具体的rtPAs包括阿替普酶、再普酶和特耐普酶。它们在临床医学上被用来治疗栓塞性或血栓性中风。出血性中风和头部外伤时禁用这种蛋白。在出现毒性的情况下,tPA的解毒剂是氨基己酸。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的t-PA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.19
1.61
1.05
0.66
0.43
0.29
0.21
0.07
校正OD 值
2.1
1.52
0.96
0.57
0.2
0.2
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠t-PA , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.7-105.3
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.2
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠t-PA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.0
91.80
88.9-96.9
93.70
89.1-110.9
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.6
94.30
87.2-108.9
98.90
105.7-115.3
108.80
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