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信号通路
英文名称: Rat Thermogenin (UCP1) ELISA Kit
别名: UCP1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.153ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
线粒体解偶联蛋白1(UCP1),也被称为热原蛋白,由UCP1基因编码,是在棕色脂肪组织中发现的线粒体载体蛋白。它用于通过不颤抖的产热产生热量,并在数量上对抵消婴儿的热量损失做出重要贡献,否则这些热量损失会因其高表面积-体积比而发生。它介导的棕色脂肪中的热量产生解耦呼吸链,允许以低ATP产生率实现快速底物氧化。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠线粒体解偶联蛋白1(UCP1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的UCP1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.51
1.96
1.24
0.72
0.46
0.3
0.22
0.09
校正OD 值
2.42
1.87
1.15
0.63
0.21
0.21
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠UCP1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
83.7-101.0
96.20
细胞裂解液(n=8)
92.1-105.1
101.40
细胞培养上清(n=8)
96.4-108.1
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度大鼠UCP1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.7
91.30
86.7-96.4
93.70
90.1-110.3
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.4
96.10
87.4-108.3
98.10
105.7-116.2
108.60
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