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信号通路
英文名称: Rat Fibronectin (FN) ELISA Kit
别名: FN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 6.25-400ng/mL
灵敏度: 2.82ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
纤连蛋白(FN)是细胞外基质的一种高分子量(约500-600 kDa)糖蛋白,与称为整合素的跨膜受体蛋白结合。纤连蛋白还与其他细胞外基质蛋白结合,如胶原蛋白、纤维蛋白和硫酸肝素蛋白多糖。纤连蛋白以蛋白二聚体的形式存在,由两条几乎相同的多肽链组成,通过一对C端二硫键连接。 每个纤连蛋白亚单位的氨基酸分子量为~230-~275 kDa,包含三种类型的模块:I型、II型和III型。所有这三种模块都是由两个反平行的β-片组成,形成一个Beta-三明治;然而,I型和II型是由链内二硫键稳定的,而III型模块不包含任何二硫键。III型模块中没有二硫键,这使得它们在受力时可以部分展开。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠纤连蛋白(FN)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠纤连蛋白(FN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的FN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
400
200
100
50
25
12.5
6.25
0
OD值
2.52
1.75
1.08
0.71
0.46
0.32
0.23
0.09
校正OD 值
2.43
1.66
0.99
0.62
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠FN , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.0-101.7
96.90
血浆(n=8)
93.6-105.2
102.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆中加入高浓度大鼠FN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.5
93.20
88.8-96.2
92.50
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.7
100.40
87.9-108.7
102.70
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