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信号通路
英文名称: Rat Plasminogen Activator Inhibitor 1 (PAI1) ELISA Kit
别名: PAI-1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血浆
隐藏域元素占位
详细信息
简介
纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)也被称为内皮凝血酶原激活剂抑制剂或血清蛋白E1,是一种由SERPINE1基因编码的蛋白质。PAI-1升高是血栓形成和动脉粥样硬化的一个风险因素。PAI-1是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin),其功能是作为组织凝血酶原激活剂(tPA)和尿激酶(uPA)的主要抑制剂,后者是凝血酶原的激活剂,因此是纤维蛋白溶解(血凝块的生理性分解)。它是一种丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)蛋白(SERPINE1)。另一种PAI,即血浆蛋白原激活剂抑制剂-2(PAI-2)由胎盘分泌,只在怀孕期间大量存在。此外,蛋白酶奈克斯作为TPA和尿激酶的抑制剂。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PAI-1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2
1.64
1.22
0.84
0.5
0.34
0.25
0.09
校正OD 值
1.91
1.55
1.13
0.75
0.25
0.25
0.16
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PAI-1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血浆(n=8)
92.4-105.5
102.10
(n=8)
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血浆中加入高浓度大鼠PAI-1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血浆
1:02
范围
平均回收率
88.1-96.2
92.90
1:04
范围
平均回收率
87.0-108.8
99.40
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