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信号通路
英文名称: ELISA Kit for Chymase (CMA1)
别名: chymase
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.072ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
肥大细胞类糜蛋白酶1(chymase),也被称为糜蛋白酶,是由CMA1基因编码的酶。该基因产物是属于肽酶家族S1的糜蛋白酶丝氨酸蛋白酶。它在肥大细胞中表达,并被认为在细胞外基质的降解、粘膜下腺分泌的调节和血管活性肽的产生中起作用。在心脏和血管中,这种蛋白质,而不是血管紧张素转化酶,主要负责将血管紧张素I转化为血管活性肽血管紧张素II。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠糜蛋白酶(chymase)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠糜蛋白酶(chymase)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的chymase, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.19
1.71
1.2
0.74
0.48
0.32
0.21
0.07
校正OD 值
2.1
1.62
1.11
0.65
0.23
0.23
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠chymase , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.5
96.60
血浆(n=8)
92.6-105.3
102.20
细胞裂解液(n=8)
96.5-108.0
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠chymase , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.5
91.80
88.4-96.6
93.60
90.4-110.3
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.5
94.40
87.5-108.4
98.80
105.2-115.3
109.40
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