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信号通路
英文名称: Rat rheumatoid factor (RF) ELISA KIT
别名: RF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000mIU/mL
灵敏度: 5.9mIU/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
类风湿因子(RF)是最早在类风湿性关节炎中发现的自身抗体。它被定义为针对 IgG 的 Fc 部分的抗体,不同的 RF 可以识别 IgG-Fc 的不同部分。RF 和IgG 结合形成免疫复合物,促成了疾病过程。类风湿因子也可以是一种低温球蛋白(血液样本冷却后沉淀的抗体);它可以是 2 型(单克隆 IgM 到多克隆 IgG)或 3 型(多克隆 IgM 到多克隆 IgG)低温球蛋白。虽然主要遇到的是 IgM,但类风湿因子可以是任何同种类型的免疫球蛋白,即 IgA、IgG、IgM、IgE、IgD。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠类风湿因子(RF)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠类风湿因子(RF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的RF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度mIU/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.22
1.56
0.92
0.63
0.42
0.25
0.18
0.08
校正OD 值
2.13
1.47
0.83
0.54
0.16
0.16
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠RF , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.8-101.0
96.90
血浆(n=8)
92.4-105.1
102.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆中加入高浓度大鼠RF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.8
93.70
88.7-96.6
92.60
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.8
100.20
87.8-108.1
102.50
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