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信号通路
英文名称: Rat Clusterin (CLU) ELISA Kit
别名: CLU
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 6.25-400ng/mL
灵敏度: 3.2ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Clusterin是一种75-80kDa的二硫连接的异质蛋白,与细胞碎片的清除和细胞凋亡有关。clusterin由8号染色体上的CLU基因编码。CLU基因包含9个外显子,在第一个外显子处表达三种异构体交替拼接。编码的蛋白异构体都定位在不同的亚细胞区间:一个异构体定位在细胞核;第二个异构体定位在细胞质;第三个异构体从细胞内分泌出来。CLU是小热休克蛋白家族的成员,因此是一种分子伴侣。与其他大多数帮助细胞内蛋白质的伴侣蛋白不同,CLU是一种高尔基体伴侣,以不依赖ATP的方式促进分泌蛋白的折叠。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠簇集蛋白(CLU)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠簇集蛋白(CLU)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的CLU, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
400
200
100
50
25
12.5
6.25
0
OD值
2.31
1.52
1.01
0.63
0.44
0.32
0.24
0.09
校正OD 值
2.22
1.43
0.92
0.54
0.23
0.23
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠CLU , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.4
96.20
血浆(n=8)
92.9-105.4
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.0
104.80
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠CLU , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.7
91.40
88.9-96.5
93.10
90.9-110.5
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.7
94.50
87.8-108.5
98.70
105.9-115.4
108.20
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