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信号通路
英文名称: Rat Perforin 1 (pf1) ELISA Kit
别名: PF1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
穿孔素 1（Perforin-1）是一种蛋白质，是由 PRF1 基因编码。穿孔素是一种 形成孔的细胞溶解蛋白，存在于细胞毒性 T 淋巴细胞（CTL）和自然杀伤细 胞（NK 细胞）的颗粒中。脱颗粒时，穿孔蛋白分子在钙调蛋白的帮助下转 移到目标细胞，钙调蛋白作为一种伴侣蛋白，防止穿孔蛋白降解。然后，穿 孔蛋白通过膜磷脂与靶细胞的质膜结合，而磷脂酰胆碱与钙离子结合，增加 穿孔蛋白与膜的亲和力。形成的孔允许亲凋亡性蛋白酶家族（称为颗粒酶） 被动扩散到目标细胞。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠穿孔素1(PF1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠穿孔素1(PF1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PF1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.7
2.05
1.31
0.77
0.49
0.3
0.21
0.1
校正OD 值
2.61
1.96
1.22
0.68
0.21
0.21
0.12
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PF1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.1-101.3
96.60
细胞裂解液(n=8)
92.3-105.6
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.0
105.20
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度大鼠PF1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.1
91.20
88.5-96.2
93.60
90.2-110.1
96.80
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.6
94.30
87.9-108.7
98.20
105.6-115.3
108.70
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