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信号通路
英文名称: Rat IL-35 ELISA Kit
别名: IL-35
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.6-1000pg/mL
灵敏度: 7.3pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
白细胞介素 35(IL-35)是 IL-12 家族的一种抗炎细胞因子。IL-12 家族的成员 IL-35 由广泛的调节性淋巴细胞产生,在免疫抑制中起作用。IL-35 可以通过 限制早期 T 细胞增殖而阻止 Th1 和 Th17 细胞的发展。IL-35 是由 IL-12α和 IL-27β链组成的二聚体蛋白,分别由两个独立的基因编码,称为 IL12A 和 EBI3(Epstein-Barr 病毒诱导基因 3)。它的受体由 IL-12Rβ2(IL-12R 的 一部分)和 gp130(IL-27R 的一部分)链组成。与这两种相关的白细胞介 素相比,IL-35 也能只通过上述链中的一条发出信号。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠白细胞介素35(IL-35)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠白细胞介素35(IL-35)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的IL-35, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.47
1.73
1.04
0.57
0.36
0.22
0.17
0.09
校正OD 值
2.38
1.64
0.95
0.48
0.13
0.13
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠IL-35 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.4
95.10
血浆(n=8)
92.8-106.9
103.40
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.0
105.50
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠IL-35 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-96.4
91.40
88.5-95.1
93.10
90.6-110.4
96.30
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.5
94.70
87.2-108.9
98.50
105.1-114.7
107.90
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