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信号通路
英文名称: Rat Leptin (LEP) ELISA Kit
别名: LEP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
瘦素是一种主要由脂肪细胞和小肠的肠细胞制造的激素,通过抑制饥饿感来帮助调节能量平衡,这反过来又减少了脂肪细胞的脂肪储存。脂肪细胞特异性激素瘦素的中心作用(效果)位置是下丘脑,它是大脑的一部分,属于中枢神经系统。瘦素的非下丘脑目标被称为外周目标。在不同的生理状态下,中枢和外周瘦素的相互作用有不同的相对重要性,在不同的物种之间也有差异。瘦素的主要功能是通过下丘脑中枢对饥饿感、食物能量利用、体育锻炼和能量平衡的影响来调节脂肪组织的质量。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠瘦素(LEP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠瘦素(LEP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的LEP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.17
1.74
1.17
0.78
0.47
0.32
0.23
0.08
校正OD 值
2.08
1.65
1.08
0.69
0.23
0.23
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠LEP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.4-101.1
96.90
血浆(n=8)
92.0-105.7
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.5
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠LEP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.2
91.70
88.3-96.6
92.60
90.4-110.2
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.9
94.20
87.7-108.7
98.80
105.1-115.2
108.60
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