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信号通路
英文名称: Rat 60kD heat shock protein (Hsp60) ELISA Kit
别名: HSP-60
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.83ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
60kD 热休克蛋白（HSP60），也称为伴侣蛋白( Cpn )，是一个热休克蛋白家族，最初按其 60kDa 的分子量分类。它们通过协助蛋白质折叠来防止蛋白质在高温等压力情况下的错误折叠。HSP60 属于协助蛋白质折叠的一大类分子，称为分子伴侣。新制造的蛋白质通常必须从氨基酸的线性链折叠成三维三级结构。折叠蛋白质的能量由每种蛋白质的氨基酸侧链之间的非共价相互作用和溶剂效应提供。大多数蛋白质自发折叠成最稳定的三维构象，这通常也是它们的功能构象，但偶尔蛋白质会错误折叠。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠热休克蛋白60(HSP-60)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠热休克蛋白60(HSP-60)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的HSP-60, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.96
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.87
0.22
0.22
0.1
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠HSP-60 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.6-101.3
97.50
血浆(n=8)
92.3-104.3
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.4
106.20
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠HSP-60 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.1
91.70
85.9-96.7
93.10
90.7-110.6
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.8
97.80
87.7-108.8
98.40
105.6-115.7
108.50
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