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信号通路
英文名称: Rat Sirtuin 1 (SIRT1)ELISA kit
别名: SIRT1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.154ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
沉默调节蛋白 1，也被称为 SIRT1 或 NAD 依赖性脱乙酰酶 sirtuin-1，是由 SIRT1 基因编码的蛋白质。它是一种主要位于细胞核中的酶。它是 sirtuin 蛋 白质家族的成员，是酿酒酵母中 Sir2 基因的同源物。sirtuin 家族的成员以 sirtuin 核心域为特征，分为四类。人类 sirtuin 的功能尚未确定;然而，已知 酵母 sirtuin 蛋白可调节表观遗传基因沉默并抑制 rDNA 的重组。研究表明， 人类 sirtuins 可能作为具有单 ADP-核糖基转移酶活性的细胞内调节蛋白发 挥作用。该基因编码的蛋白质包含在 sirtuin 家族的 I 类中。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠沉默调节蛋白1(SIRT1)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠沉默调节蛋白1(SIRT1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的SIRT1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.04
1.38
0.88
0.53
0.35
0.24
0.18
0.1
校正OD 值
1.95
1.29
0.79
0.44
0.15
0.15
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠SIRT1 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.4-101.2
99.90
细胞裂解液(n=8)
92.0-106.5
102.60
细胞培养上清(n=8)
95.0-108.4
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度大鼠SIRT1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.7
91.70
88.0-96.5
93.30
90.6-110.3
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.0
94.30
87.0-108.2
98.10
105.4-115.7
108.10
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