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信号通路
英文名称: Rat Aquaporin 2, Collecting Duct (AQP-2) ELISA Kit
别名: AQP-2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.23ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
AQP2存在于肾脏集合管主细胞的顶端细胞膜和位于整个细胞的细胞内囊泡中。它是唯一受加压素调控的水通道蛋白。水通道蛋白2的基本工作是在肾脏从血液中清除水分时从尿液中重新吸收水分,它在肾脏上皮细胞中,通常蛰伏在细胞内的囊泡膜中。当需要时,加压素与细胞表面的加压素受体结合,从而激活一个信号通路,使含有水通道蛋白2的囊泡与质膜融合,因此水通道蛋白2可以被细胞使用。这种水通道蛋白受肽类激素加压素的调节,有两种方式。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠水通道蛋白2(AQP-2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠水通道蛋白2(AQP-2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的AQP-2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.52
1.96
1.38
0.96
0.55
0.31
0.19
0.08
校正OD 值
2.43
1.87
1.29
0.87
0.22
0.22
0.1
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠AQP-2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.6-101.6
96.80
细胞裂解液(n=8)
92.0-105.2
102.20
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠AQP-2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.7
93.10
88.8-96.8
92.90
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.7
102.40
87.2-108.0
105.60
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