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信号通路
英文名称: Rat N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide (NT-ProANP) ELISA Kit
别名: NT-ProANP
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
氨基端前心钠肽(NT-ProANP)是指ANP前体的N端多肽。在心房细胞的粗糙小体中,首先产生149个氨基酸残基的前ANP,其信号肽(23个氨基酸)在高尔基体中被切断,留下126个氨基酸的前ANP,储存在分泌颗粒中。在分泌前,98个氨基酸的N端肽(NT-pro ANP)和28个氨基酸的C端肽(ANP)被分离。NT-pro ANP由于不与清除受体结合,具有较长的半衰期,可作为ANP分泌的极佳标志。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠氨基端前心钠肽(NT-ProANP)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠氨基端前心钠肽(NT-ProANP)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的NT-ProANP, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.59
1.57
0.94
0.64
0.38
0.26
0.23
0.08
校正OD 值
2.5
1.48
0.85
0.55
0.17
0.17
0.14
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠NT-ProANP , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.8
96.10
血浆(n=8)
92.6-105.5
101.90
细胞培养上清(n=8)
96.6-108.1
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠NT-ProANP , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.5-95.4
91.50
88.3-96.1
93.20
90.8-110.7
96.20
1:04
范围
平均回收率
89.6-103.1
94.20
87.8-108.0
98.20
105.9-115.4
108.10
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