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信号通路
英文名称: Rat Inhibitory Subunit Of NF Kappa B Alpha (IkBa)
别名: IkBα
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000pg/mL
灵敏度: 7.6pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核因子κB抑制因子α(IkBa)是细胞蛋白家族中的一个成员,其功能是抑制NF- κB 转录因子。IκBα通过掩盖 NF-κB 蛋白的核定位信号(NLS)并使其在细 胞质中保持非活性状态而抑制 NF-κB。此外,IκBα阻止 NF-κB 转录因子与 DNA 结合的能力,而这是 NF-κB 正常运作所需要的。编码 IκBα蛋白的基因 在一些霍奇金淋巴瘤细胞中发生突变;这种突变使 IκBα蛋白失活,从而导致 NF-κB 在淋巴瘤肿瘤细胞中长期处于活跃状态。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠核因子κB抑制因子α(IkBα)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠核因子κB抑制因子α(IkBα)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的IkBα, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
1000
500
250
125
62.5
31.2
15.6
0
OD值
2.72
1.63
0.9
0.54
0.35
0.27
0.22
0.08
校正OD 值
2.63
1.54
0.81
0.45
0.18
0.18
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠IkBα , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.4-106.8
96.70
细胞裂解液(n=8)
96.8-107.6
102.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠IkBα , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.8-92.9
90.70
90.7-112.2
99.90
1:04
范围
平均回收率
89.1-105.6
102.70
105.9-119.1
107.90
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