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信号通路
英文名称: Rat Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B Ligand (RANkL) ELISA Kit
别名: RANKL
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.06ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核因子κB受体活化因子配基(RANKL),是一种由TNFSF基因编码的蛋白质。也被称为肿瘤坏死因子配体超家族成员11(TNFSF11)、肿瘤坏死因子相关诱导细胞因子(TRANCE)、蚀骨细胞抑制因子配体(OPGL)或蚀骨细胞分化因子(ODF)。RANKL为肿瘤坏死因子超家族的一员,属于第二型穿膜蛋白。可以影响免疫系统和调控骨质新生和重塑。RANKL在骨骼的新陈代谢方面,扮演着相当重要的角色。他是造骨细胞(osteoblast)膜上的一种膜蛋白,可以活化蚀骨细胞,会加速蚀骨细胞破坏骨质并被吸收,为骨质更新的重要一环。当造骨细胞膜上的RANKL,活化了蚀骨细胞膜上的RANK蛋白,蚀骨作用就会开始。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的RANKL, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.33
1.76
1.16
0.7
0.46
0.33
0.24
0.1
校正OD 值
2.24
1.67
1.07
0.61
0.24
0.24
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠RANKL , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.9-101.7
96.40
血浆(n=8)
92.6-105.6
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.8-108.6
105.90
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠RANKL , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.5
91.80
88.4-96.9
93.90
90.9-110.5
95.10
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.5
94.90
87.6-108.7
98.70
105.5-115.7
108.50
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