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信号通路
英文名称: Rat Receptor Activator Of Nuclear Factor Kappa B (RANK) ELISA Kit
别名: RANK
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
核因子κB受体活化因子(RANK)，又称TRANCE受体或TNFRSF11A，是肿瘤坏死因子受体（TNFR）分子亚家族的一员。RANK是RANK-配体（RANKL）的受体，是调节破骨细胞分化和激活的RANK/RANKL/OPG信号传导途径的一部分。骨保护素（OPG）是RANKL的诱饵受体，并通过竞争RANKL来调节RANK信号通路的刺激。RANK的细胞质结构域与TRAFs 1、2、3、5和6结合，将信号传递给下游目标，如NF-κB和JNK。RANK是一个616个氨基酸的I型跨膜蛋白。它的细胞外结构域由184个氨基酸组成，其跨膜结构域有21个氨基酸，其细胞质结构域由383个氨基酸组成。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠核因子κB受体活化因子(RANK)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠核因子κB受体活化因子(RANK)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的RANK, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.32
1.5
0.87
0.52
0.35
0.24
0.18
0.08
校正OD 值
2.23
1.41
0.78
0.43
0.15
0.15
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠RANK , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.4-101.4
96.80
血浆(n=8)
92.2-105.7
102.50
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.9
105.30
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠RANK , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.9
91.30
88.8-96.3
93.90
90.6-110.1
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.2
94.40
87.4-107.7
98.10
105.1-115.7
108.80
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