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信号通路
英文名称: Rat Nuclear Factor Kappa B (NFkB) ELISA Kit
别名: NF-κB
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.11ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
NF-κB(或NF-kappaB,"激活B细胞的核因子卡帕光链增强剂")是一种控制DNA转录、细胞因子产生和细胞生存的蛋白质复合物。它几乎存在于所有动物细胞类型中,并参与细胞对刺激的反应,如压力、细胞因子、自由基、重金属、紫外线照射、氧化的低密度脂蛋白以及细菌或病毒抗原。NF-κB在调节对感染的免疫反应中起着关键作用,它还与突触可塑性和记忆的过程有关,与B细胞中免疫球蛋白轻链增强子的11个碱基对序列相互作用。NF-κB家族的所有蛋白在其N端都有一个Rel同源结构域。NF-κB蛋白的一个亚家族,包括RelA、RelB和c-Rel,在其C端有一个转录域。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠核因子κB(NF-κB)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠核因子κB(NF-κB)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的NF-κB, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.38
1.47
0.84
0.48
0.32
0.25
0.2
0.09
校正OD 值
2.29
1.38
0.75
0.39
0.16
0.16
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠NF-κB , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
92.0-105.8
102.10
细胞裂解液(n=8)
96.1-108.0
104.80
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠NF-κB , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
88.2-96.2
92.20
90.6-110.8
97.90
1:04
范围
平均回收率
87.2-108.5
102.30
105.0-115.6
107.60
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