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信号通路
英文名称: Rat Microtubule Associated Protein 1 Light Chain 3 (LC3) ELISA Kit
别名: LC3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.075ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
微管相关蛋白轻链3 (MAP1LC3) 通常缩写为 LC3，其是一种可溶性蛋白，分子量约为 17 kDa。LC3普遍存在于哺乳动物组织和培养细胞中，是自噬（真核细胞的回收系统）的关键组分。其在自噬体生物合成过程中掺入自噬体的内外膜。因此，LC3是自噬（尤其是自噬体形成）的特异性标志物。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠微管相关蛋白轻链3(LC3)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠微管相关蛋白轻链3(LC3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的LC3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.05
1.12
0.57
0.35
0.25
0.2
0.18
0.08
校正OD 值
1.96
1.03
0.48
0.26
0.11
0.11
0.09
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠LC3 , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.1-102.2
96.40
细胞裂解液(n=8)
92.6-106.5
103.90
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.1
104.20
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液细胞培养上清中加入高浓度大鼠LC3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.7-95.6
91.40
88.2-96.7
93.30
90.3-110.6
96.90
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.8
94.40
87.8-108.2
98.20
105.7-114.9
107.50
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