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信号通路
英文名称: Rat Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM) ELISA Kit
别名: HCAM
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.05ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
归巢关联细胞黏附分子(HCAM),也被称为CD44,是一种广泛表达的细胞表面粘附分子。它是一种细胞表面的糖蛋白,参与细胞与细胞的相互作用、细胞粘附和迁移。由11号染色体上的CD44基因编码。CD44在大量的哺乳动物细胞类型中表达。由1-5和16-20号外显子组成的标准异构体,在大多数细胞类型中都有表达,被称为CD44s。含有可变外显子的CD44剪接变体被指定为CD44v。一些上皮细胞也表达一个较大的异构体(CD44E),包括第8-10号外显子。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠归巢关联细胞黏附分子(HCAM)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠归巢关联细胞黏附分子(HCAM)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的HCAM, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0.15
0
OD值
2.6
1.9
1.24
0.75
0.46
0.31
0.22
0.07
校正OD 值
2.51
1.81
1.15
0.66
0.22
0.22
0.13
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠HCAM , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.3-101.0
96.90
血浆(n=8)
92.6-105.0
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.7
105.60
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠HCAM , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.9
90.70
88.2-96.5
93.30
90.3-110.6
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.7
94.70
87.2-108.8
98.50
105.8-115.2
108.80
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