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信号通路
英文名称: Rat Actin Alpha 2, Smooth Muscle (ACTa2) ELISA Kit
别名: ACTa2
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200ng/mL
灵敏度: 1.24ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
平滑肌肌动蛋白α2(ACTa2)(通常称为α-平滑肌肌动蛋白或α-SMA),常被用作肌成纤维细胞形成的标志物。ACTa2是6种不同的肌动蛋白异构体之一,是参与平滑肌的收缩装置。它与所有的肌动蛋白一样是高度保守的,几乎在所有的哺乳动物中都能找到。ACT2位于10q22-q24的ACTA2基因编码。该基因的突变导致各种血管疾病,如胸主动脉疾病、冠状动脉疾病、Moyamoya病和多系统平滑肌功能障碍综合症。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠平滑肌肌动蛋白α2(ACTa2)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠平滑肌肌动蛋白α2(ACTa2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ACTa2, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.31
1.29
0.72
0.45
0.31
0.22
0.18
0.08
校正OD 值
2.22
1.2
0.63
0.36
0.13
0.13
0.09
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ACTa2 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
84.1-101.6
96.50
细胞裂解液(n=8)
94.2-108.8
103.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠ACTa2 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.8-95.3
92.30
90.8-110.3
97.50
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.4
95.60
105.4-115.7
107.10
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