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信号通路
英文名称: Rat Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) ELISA Kit
别名: MIF
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
巨噬细胞移动抑制因子（MIF），又称糖基化抑制因子（GIF）、L-多巴色异构酶或苯丙酮酸同构酶，是一种由MIF基因编码的蛋白质。该基因编码的淋巴因子参与细胞介导的免疫、免疫调节和炎症。MIF通过抑制糖皮质激素的抗炎作用，在宿主防御中对巨噬细胞的功能起调节作用。该淋巴因子和JAB1蛋白在细胞膜外周附近形成复合物。MIF是先天性免疫的一个重要调节因子。MIF蛋白超家族还包括第二个具有功能相关特性的成员，即D-多巴色异构酶（D-DT）。CD74是MIF的表面受体。巨噬细胞移动抑制因子组装成一个三聚体，由三个相同的亚基组成。每个单体都含有两个反平行的α螺旋和一个四股的β片。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的MIF, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.21
1.82
1.51
1.08
0.79
0.5
0.35
0.09
校正OD 值
2.12
1.73
1.42
0.99
0.41
0.41
0.26
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠MIF , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84.2-101.4
96.70
血浆(n=8)
92.0-105.9
102.80
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.3
104.40
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠MIF , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.0
91.60
88.2-96.2
93.40
90.8-110.9
95.30
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.2
94.20
87.2-108.6
98.70
105.2-115.4
108.50
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