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信号通路
英文名称: Rat Occludin (OCLN) ELISA Kit
别名: OCLN
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.312-20ng/mL
灵敏度: 0.154ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
密封蛋白，也被称为OCLN，是由OCLN基因编码的酶。它是一种氧化NADH的酶。它首先在上皮细胞中被鉴定为位于紧密连接处的65kDa完整质膜蛋白。与 Claudins和zonula occludens-1 (ZO-1) 一起，它被认为是紧密连接的主要成分。它不仅存在于上皮/内皮细胞中，而且还在没有紧密连接但代谢非常活跃的细胞中大量表达：周细胞、神经元和星形胶质细胞、少突胶质细胞、树突细胞、单核细胞/巨噬细胞 淋巴细胞和心肌。它影响细胞代谢的关键方面，如葡萄糖摄取、ATP产生和基因表达。它在维持紧密连接的阻隔特性方面起着关键作用。因此，它的突变或缺失会增加上皮渗漏，这是预防癌症转移的重要屏障。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠密封蛋白(OCLN)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠密封蛋白(OCLN)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的OCLN, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0
OD值
2.36
1.36
0.8
0.48
0.34
0.28
0.23
0.09
校正OD 值
2.27
1.27
0.71
0.39
0.19
0.19
0.14
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠OCLN , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.5-104.5
96.30
细胞裂解液(n=8)
92.3-105.4
103.30
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠OCLN , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.8
93.20
88.0-98.3
92.40
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.6
95.50
87.9-108.1
99.60
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