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信号通路
英文名称: Rat Matrix Metalloproteinase 8 (MMP-8) ELISA Kit
别名: MMP-8
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.26ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
基质金属蛋白酶-8(MMP-8),又称中性粒细胞胶原酶,是一种胶原蛋白的裂解酶,存在于大多数哺乳动物的结缔组织中。该基因是定位于染色体11q22.3的MMP基因组的一部分。大多数MMP是以非活性原蛋白的形式分泌的,当被细胞外蛋白酶裂解时被激活。然而,该基因所编码的酶储存在中性粒细胞内的次级颗粒中,并通过自溶裂解被激活。基质金属蛋白酶(MMP)家族的蛋白质参与正常生理过程中细胞外基质的分解,如胚胎发育、生殖和组织重塑,以及疾病过程,如关节炎和转移。MMP-8的主要功能是降解I、II和III型胶原蛋白。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠基质金属蛋白酶8(MMP-8)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠基质金属蛋白酶8(MMP-8)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的MMP-8, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.36
1.78
1.23
0.79
0.46
0.29
0.17
0.09
校正OD 值
2.27
1.69
1.14
0.7
0.2
0.2
0.08
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠MMP-8 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
87.5-101.6
96.50
血浆(n=8)
92.6-105.3
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.0
104.80
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠MMP-8 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
85.1-95.2
91.20
88.2-96.9
93.50
90.1-110.3
96.50
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
94.50
87.2-108.6
98.90
105.8-115.4
108.60
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