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信号通路
英文名称: Rat Matrix Metalloproteinase 13 (MMP-13) ELISA Kit
别名: MMP-13
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.62-40ng/mL
灵敏度: 0.24ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
基质金属蛋白酶13(MMP-13),又叫胶原酶3(GLG3),是由MMP13基因编码的酶。它是基质金属蛋白酶家族的成员。像大多数MMP一样,它是作为非活性前体形式分泌的。一旦前结构域被切割,它就会被激活,留下由催化结构域和血红素结合蛋白样结构域PDB组成的活性酶:1PEX。虽然实际机制尚未描述,但血红素结构域参与胶原降解,催化结构域本身在胶原降解方面效率特别低下。在胚胎发育过程中,它在骨骼中表达,这是重组胶原基质以进行骨矿化所必需的。在病理情况下,它被高度过度表达。它的转录调控由于其有效的蛋白水解能力而受到严格控制。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠基质金属蛋白酶13(MMP-13)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的MMP-13, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
40
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0
OD值
2.36
1.49
0.95
0.54
0.35
0.26
0.21
0.09
校正OD 值
2.27
1.4
0.86
0.45
0.17
0.17
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠MMP-13 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-103.8
96.60
血浆(n=8)
92.7-105.9
101.70
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆中加入高浓度大鼠MMP-13 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
84.2-95.7
93.60
88.9-96.2
92.30
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.3
95.70
87.9-108.5
99.50
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