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英文名称: Rat Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) ELISA Kit
别名: LCAT
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.14ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)是一种酶,它属于磷脂:二酰基甘油酰转移酶家族。它将游离胆固醇转化为胆固醇酯(胆固醇的一种更疏水的形式),然后被封存到脂蛋白颗粒的核心中,最终使新合成的高密度脂蛋白成为球形,并迫使反应变得单向,因为颗粒从表面被移除。该酶在血浆中与高密度脂蛋白(HDL)(α-LCAT)和低密度脂蛋白(β-LCAT)结合。 LCAT缺乏可导致胆固醇角膜混浊导致的视力受损、贫血和肾脏损伤。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的LCAT, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.14
1.63
1.16
0.78
0.57
0.43
0.24
0.07
校正OD 值
2.05
1.54
1.07
0.69
0.34
0.34
0.15
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆中加入 3 个不同浓度水平的大鼠LCAT , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-101.6
96.40
血浆(n=8)
92.8-105.8
102.40
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆中加入高浓度大鼠LCAT , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
1:02
范围
平均回收率
85.4-95.3
93.40
88.1-96.5
92.20
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.9
95.40
87.4-108.8
99.60
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