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信号通路
英文名称: Rat Endostatin (ES) ELISA Kit
别名: ES
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 31.25-2000pg/mL
灵敏度: 15.11pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
内皮抑素(ES),又叫内抑素,是天然存在的20-kDa C端片段,源自XVIII 型胶原蛋白。据报道,它可以用作抗血管生成剂,类似于血管抑制素和血小板反应蛋白。它是一种广谱血管生成抑制剂,可能会干扰碱性成纤维细胞生长因子(bFGF/FGF-2)和血管内皮生长因子(VEGF)等生长因子的促血管生成作用。它通过许多影响细胞活力和运动的途径抑制血管生成。它抑制增殖内皮细胞中的细胞周期控制和抗凋亡基因,导致细胞死亡;通过干扰JNK的TNF-α激活来阻断由c-Jun N末端激酶控制的促血管生成基因表达;通过抑制细胞周期蛋白D1来减少新细胞的生长。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠内皮抑素(ES)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠内皮抑素(ES)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的ES, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
2000
1000
500
250
125
62.5
31.25
0
OD值
2.49
1.95
1.22
0.7
0.45
0.29
0.21
0.08
校正OD 值
2.4
1.86
1.13
0.61
0.2
0.2
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠ES , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
87.1-101.6
96.60
血浆(n=8)
92.2-105.2
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.2-108.6
106.20
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠ES , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.9-95.5
91.90
88.1-96.0
93.50
90.9-110.5
96.10
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.5
94.40
87.4-108.1
98.20
105.1-115.4
110.10
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