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信号通路
英文名称: Rat Neutrophil extracellular trap network(NETs) ELISA Kit
别名: NETs
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.076ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
中性粒细胞胞外诱捕网络(NETs)主要由中性粒细胞的DNA组成,它与病原体结合。中性粒细胞是免疫系统对抗感染的第一道防线,传统上被认为是通过两种策略杀死入侵的病原体:吞噬微生物和分泌抗微生物物质。NETs使中性粒细胞能够杀死细胞外病原体,同时最大限度地减少对宿主细胞的损害。ETs提供高局部浓度的抗菌成分,并在细胞外与吞噬细胞摄取无关地结合、解除和杀死微生物。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠中性粒细胞胞外诱捕网络(NETs)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠中性粒细胞胞外诱捕网络(NETs)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的NETs, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.68
1.74
1.01
0.67
0.41
0.28
0.2
0.09
校正OD 值
2.59
1.65
0.92
0.58
0.19
0.19
0.11
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠NETs , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.1-102.0
96.20
血浆(n=8)
92.1-106.9
103.80
细胞培养上清(n=8)
96.7-108.7
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠NETs , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.3-95.8
91.10
88.2-96.4
93.50
90.3-110.8
96.70
1:04
范围
平均回收率
89.8-103.8
94.60
87.7-108.3
98.70
105.7-114.1
107.90
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