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信号通路
英文名称: Rat Procollagen I (PCI) ELISA Kit
别名: PCⅠ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.78-50ng/mL
灵敏度: 0.36ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
在原胶原蛋白向胶原蛋白的细胞外转化过程中,原胶原蛋白前肽,即原胶原蛋白I型羧基端前肽(PICP)和原胶原蛋白I型氨基端前肽(PINP),被释放到循环中。I型胶原蛋白是由两条相同的α1(I)多肽链和一条α2(I)多肽链组成的三聚体,是骨基质的主要蛋白质(90%)。它是由成骨细胞合成的前体,并分泌到细胞外空间,在那里它经历了一系列翻译后的修饰,包括由特定的蛋白酶裂解的前肽。前肽被释放到循环中,新形成的胶原蛋白分子组装成纤维状。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠Ⅰ型前胶原(PCⅠ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PCⅠ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0.78
0
OD值
2.38
1.8
1.28
0.89
0.6
0.45
0.33
0.09
校正OD 值
2.29
1.71
1.19
0.8
0.36
0.36
0.24
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PCⅠ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-101.5
96.40
血浆(n=8)
92.7-105.3
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.8
104.70
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠PCⅠ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.1
91.90
88.3-96.6
93.70
90.6-110.6
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.3-103.4
94.80
87.7-108.6
98.30
105.1-115.2
108.80
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