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信号通路
英文名称: Rat Amyloid beta(Aβ)ELISA Kit
别名: Aβ
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 7.81-500pg/mL
灵敏度: 3.88pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
β 淀粉样蛋白( amyloid-β,Aβ) 是由淀粉样前体蛋白( amyloid precursor protein,APP) 经 β-和 γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有 39~43 个氨基酸的多肽。它可由多种细胞产生,循环于血液、脑脊液和脑间质液中, 大多与伴侣蛋白分子结合,少数以游离状态存在。 Aβ最常见的亚型是 Aβ 1~ 40 和 Aβ1~ 42。在脑脊液和血中,Aβ1~ 40 分别比 Aβ1~ 42 的 含量水平高 10 倍和 1. 5 倍,Aβ1~ 42 具有更强的毒性,且更容易聚集, 从而形成 Aβ 沉淀的核心,引发神经毒性作用。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠β淀粉样蛋白(Aβ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Aβ, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
500
250
125
62.5
31.25
15.62
7.81
0
OD值
2.28
1.24
0.67
0.35
0.19
0.14
0.11
0.09
校正OD 值
2.19
1.15
0.58
0.26
0.05
0.05
0.02
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Aβ , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.7-101.5
96.60
血浆(n=8)
92.7-105.3
102.40
细胞培养上清(n=8)
96.1-108.8
105.20
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Aβ , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.0-95.7
91.40
88.4-100.3
93.70
90.6-110.3
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.7-103.7
94.70
87.3-108.4
98.70
105.1-115.5
108.60
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