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信号通路
英文名称: Rat Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3 (Smad3) ELISA Kit
别名: Smad3
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.31-20ng/mL
灵敏度: 0.12ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Smad同源物3也被称为SMAD家族成员3或SMAD3,是一种由SMAD3基因编码的蛋白质。SMAD3是SMAD家族蛋白的一个成员。它是由转化生长因子β(TGF-β)超家族细胞因子发起的信号的介体,调节细胞的增殖、分化和死亡。SMAD3基因位于15号染色体上的15q22.33的细胞带。该基因由9个外显子组成,超过129,339个碱基对。SMAD3是一个多肽,分子量为48,080 Da,它属于SMAD家族的蛋白质。它被SARA(用于受体激活的SMAD锚)招募到膜上,TGF-β受体位于那里。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠Smad同源物3(Smad3)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠Smad同源物3(Smad3)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Smad3, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
20
10
5
2.5
1.25
0.62
0.31
0
OD值
2.49
1.92
1.37
0.88
0.57
0.41
0.27
0.09
校正OD 值
2.4
1.83
1.28
0.79
0.32
0.32
0.18
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Smad3 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.5-101.9
96.20
血浆(n=8)
92.9-105.8
102.70
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.9
105.10
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Smad3 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.2
91.30
87.7-96.3
93.10
90.2-110.6
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.4-103.5
94.90
87.1-108.3
98.80
105.8-115.4
108.10
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