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信号通路
英文名称: Rat S100 Calcium Binding Protein A4 (S100A4) ELISA Kit
别名: S100A4
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 1.56-100ng/mL
灵敏度: 0.62ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
S100钙结合蛋白A4(S100A4),也被称为MTS1,由S100A4基因编码的蛋白质。它是由肿瘤和基质细胞分泌的S100钙结合蛋白家族的成员,通过刺激血管生成来支持肿瘤发生。它通过RAGE受体与血管内皮生长因子(VEGF)协同作用,通过增加KDR表达和MMP-9活性来促进内皮细胞迁移。它与细胞骨架的成分高度相关,当该基因上调时,它会改变细胞的形态,使其更容易受到蛋白质的侵袭,例如组织蛋白酶B和细胞周期蛋白B1,这些蛋白质有助于转移。在表现出淋巴结转移的样本中发现S100A4的水平明显高于那些没有淋巴结转移的样本,这表明它可能导致异常胶原沉积。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠S100钙结合蛋白A4(S100A4)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠S100钙结合蛋白A4(S100A4)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的S100A4, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
100
50
25
12.5
6.25
3.12
1.56
0
OD值
2.47
1.91
1.34
0.87
0.61
0.42
0.31
0.09
校正OD 值
2.38
1.82
1.25
0.78
0.33
0.33
0.22
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠S100A4 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
86.7-101.8
96.50
血浆(n=8)
92.5-105.5
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.8
106.90
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠S100A4 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.2
90.70
86.3-96.2
93.30
90.5-110.1
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.1-103.3
94.90
87.7-108.7
98.90
105.0-115.3
110.10
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