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信号通路
英文名称: Rat S100 Calcium Binding Protein (S100) ELISA Kit
别名: S100
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 3.12-200pg/mL
灵敏度: 0.26pg/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
S100钙结合蛋白,是一种脊椎动物的低分子量蛋白质家族,其特征是具有螺旋-环-螺旋(“EF手型”)构象的两个钙结合位点。已知有21种不同的S100蛋白。编码这些蛋白的基因家族的基因以S100为前缀,如S100A1, S100A2, S100A3等。这一家族的蛋白也被视为是损伤相关分子模式的分子。大多数S100蛋白由两个相同的多肽组成,它们由非共价键保持在一起。它们在结构上与钙调素相似。然而,它们与其他特征上与钙调蛋白不同。例如,它们的表达模式是细胞特异性的,即它们在特定的细胞类型中表达。它们的表达取决于环境因素。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠S100钙结合蛋白(S100)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠S100钙结合蛋白(S100)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的S100, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度pg/mL
200
100
50
25
12.5
6.25
3.12
0
OD值
2.36
1.79
1.28
0.86
0.63
0.38
0.26
0.08
校正OD 值
2.27
1.7
1.19
0.77
0.29
0.29
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠S100 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
86.3-101.7
96.20
血浆(n=8)
92.2-105.2
102.60
细胞培养上清(n=8)
96.0-108.4
106.30
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠S100 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.1-95.5
91.80
88.8-96.5
93.60
90.5-110.7
96.60
1:04
范围
平均回收率
89.2-103.2
94.10
87.4-108.4
98.70
105.8-115.7
108.60
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