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信号通路
英文名称: Rat Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1) ELISA Kit
别名: Rac1
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.156-10ng/mL
灵敏度: 0.07ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
Ras相关C3肉毒菌毒素底物1,也称为Rac1,是一种蛋白质,由RAC1基因编码。该基因可以产生多种可变剪接形式的Rac1蛋白,它们似乎具有不同的功能。它是一种小型信号G蛋白(更具体地说是GTP酶),是GTP酶Rho家族的Rac亚家族的成员。该超家族的成员似乎调节各种细胞事件,包括控制GLUT4易位到葡萄糖摄取,细胞生长,细胞骨架重组,抗菌细胞毒性和蛋白激酶的激活。它是许多细胞过程的多效性调节剂,包括细胞周期、细胞粘附、运动性和上皮分化。它具有无处不在的组织表达,并通过形成薄片来驱动细胞运动。它在胰岛素敏感组织中大量表达,例如脂肪组织和骨骼肌。它对于通过运动激活的骨骼肌葡萄糖摄取也是必需的。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠Ras相关C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的Rac1, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.156
0
OD值
2.19
1.34
0.79
0.52
0.35
0.26
0.21
0.09
校正OD 值
2.1
1.25
0.7
0.43
0.17
0.17
0.12
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠组织匀浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠Rac1 , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
组织匀浆(n=8)
94.9-105.3
102.90
细胞培养上清(n=8)
96.9-108.0
103.50
(n=8)
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠Rac1 , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
组织匀浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
86.8-96.9
91.70
90.4-110.5
92.60
1:04
范围
平均回收率
87.8-108.5
99.60
105.8-115.0
108.80
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