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信号通路
英文名称: Rat Selectin, Platelet (SELP) ELISA Kit
别名: P-Selectin
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 15.62-1000ng/mL
灵敏度: 6.31ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
P选择素(P-Selectin)是相对分子质量为140000的糖蛋白,存在于血管内皮细胞的Weibe-l Palade 小体膜上及血小板α颗粒膜上,在受到组织胺、凝血酶、佛波酯和钙离子载体的刺激后,其迅速在质膜上表达, 缺氧/再氧化或氧自由基也可诱导表达。P选择素凝集素样区是配体结合部位的关键序列,其配体是唾液酸化路易斯( S-Lewis x ) , 高亲和力的配体是P选择素糖蛋白配体1( P-selectin glycoproteinlig and 1, PSGL-1) , 主要表达于中性粒细胞和单核细胞。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被有大鼠P选择素(P-Selectin)捕获抗体的微孔中,依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体,HRP酶结合物,中间经过温育和洗涤,用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠P选择素(P-Selectin)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的P-Selectin, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
1000
500
250
125
62.5
31.25
15.62
0
OD值
2.23
1.31
0.9
0.62
0.43
0.32
0.26
0.1
校正OD 值
2.14
1.22
0.81
0.53
0.23
0.23
0.17
-
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
注意:本图仅供参考,应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 :板内变异系数小于 10% ,板间变异系数小于10%。
回收率 :在选取的健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入 3 个不同浓度水平的大鼠P-Selectin , 计算回收率。
样本类型
范围(%)
平均回收率(%)
血清(n=8)
84.2-103.6
97.30
血浆(n=8)
92.0-105.8
102.30
细胞培养上清(n=8)
96.5-108.7
105.70
线性稀释:分别在选取的4份健康大鼠血清血浆细胞培养上清中加入高浓度大鼠P-Selectin , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ,评估线性。
(矫正OD值根据表格内容来写展现规则,矫正OD值有数值则展现.)
稀释比例
回收率(%)
血清
血浆
细胞培养上清
1:02
范围
平均回收率
84.4-95.9
91.50
88.9-96.7
93.90
90.0-110.4
96.40
1:04
范围
平均回收率
89.9-103.8
94.70
86.2-108.0
97.80
105.2-115.3
108.80
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