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信号通路
英文名称: Rat p53 Upregulated Modulator Of Apoptosis (PUMA) ELISA Kit
别名: PUMA
实验类型: 双抗体夹心法
检测范围: 0.15-10ng/mL
灵敏度: 0.04ng/mL
种属: 大鼠
保存温度: 2-8℃
样本类型: 组织匀浆、细胞裂解液和其他生物液体
隐藏域元素占位
详细信息
简介
p53上调凋亡调节因子(PUMA)也被称为Bcl-2结合成分3（BBC3），是一种促凋亡蛋白，是Bcl-2蛋白家族的成员。它参与各种信号诱导的p53依赖性和非依赖性凋亡，并受转录因子的调节。激活后，它与抗凋亡的Bcl-2家族成员相互作用，从而释放出Bax和/或Bak，然后能够向线粒体发出凋亡信号。线粒体功能失调后，caspase级联被激活，最终导致细胞死亡。
实验原理
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被有大鼠p53上调凋亡调节因子(PUMA)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，HRP酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶(HRP)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样本中的大鼠p53上调凋亡调节因子(PUMA)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
特异性
可检测样本中大鼠的PUMA, 且与其类似物无明显交叉反应。
典型数据和参考曲线
以下数据和曲线仅供参考 ，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
浓度ng/mL
10
5
2.5
1.25
0.625
0.312
0.15
0
OD值
2.53
1.94
1.39
1.19
0.76
0.43
0.26
0.08
校正OD 值
2.44
1.85
1.3
1.1
0.34
0.34
0.17
-
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
试剂盒性能
重复性 ：板内变异系数小于 10% ，板间变异系数小于10%。
回收率 ：在选取的健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入 3 个不同浓度水平的大鼠PUMA , 计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
组织匀浆(n=8)
84.9-101.2
96.40
细胞裂解液(n=8)
96.5-108.1
105.70
(n=8)
线性稀释：分别在选取的4份健康大鼠组织匀浆细胞裂解液中加入高浓度大鼠PUMA , 在标准曲线动力学范围内进行稀释 ，评估线性。
（矫正OD值根据表格内容来写展现规则，矫正OD值有数值则展现.）
稀释比例
回收率（%）
组织匀浆
细胞裂解液
1:02
范围
平均回收率
84.6-95.0
92.10
90.3-110.1
92.90
1:04
范围
平均回收率
89.0-103.5
99.60
105.6-115.1
108.90
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